공식적인 데뷔작은 2007년 KBS1일일 드라마미우나 고우나에서 서주경 역을 맡은 것이지만 배우 인생의 첫 연기는 2004년 아는 여자로 시작되었다. 스튜어디스과[1] 재학생이던 시절에 시험 준비를 하고 있었는데, 2004년 영화 아는 여자 촬영팀이 그녀의 학교에 항공기 추락씬을 촬영하러 왔었고, 지도교수의 추천으로 스튜어디스역을 맡은 바 있다. (얼굴은 나오지 않는다.)[2] 당시에 최고의 배우들이 머물던 싸이더스HQ에 소속되어 배우 연습생의 길을 걷기 시작했다. 채널V, M-net 등에서 방송활동을 하며 착실히 연기수업을 하던 중[3], 싸이더스HQ의 간판 김선아가 영화 목요일의 아이에 캐스팅되었고 같은 소속사 배우로서 함께 촬영에 참여했으나, 영화 촬영이 중반에 엎어지며 '목요일의 아이' 촬영분을 모두 폐기하는 바람에 필모그래피에서는 빠진 작품이 되었다. '목요일의 아이'가 엎어지고 난 뒤 공식 데뷔 이전까지 단역으로 출연한 작품들 중에 발견된 작품이 두 작품이 있는데, 그중 하나는 김수현작가의 내 남자의 여자 7화에서 이훈의 상대역으로 약 10초간 등장. 또다른 하나는 드라마 히트에서 극 후반부에 간호사 역할로 등장했다 납치되어 살해당하는데 당시에 얼짱 간호사로 실시간 검색어에 오르기도 했다.
그녀가 대중들에게 어필을 하고, 사랑을 받게 된 데에는 2010년 추노에 작은 주모로 출연한 것과 그로 인해 신의 퀴즈에 캐스팅되었던 것이 가장 컸다. 2010년 강경희 역으로 인지도를 올리기 시작했고, 2014년 SBS일일 드라마인 달려라 장미의 악역 강민주 역, 2015년 디데이에서 간호사 역으로 좋은 연기력을 보여주며 인지도를 넓히며 본격적으로 사람들에게 알려지기 시작했으나...
<rowcolor=#fff> 영화 타투에서의 조수나 扮
2015년 말 송일국 주연의 영화 타투에서 많은 사람들이 이 영화에서의 그녀에 대한 평가는... 한때나마 그녀를 보며 가슴 설레였던 많은 팬들이 그녀에게 쌍욕(...)을 시전하는 등 커리어 최악의 흑역사를 찍고야 말았다...[4]
<rowcolor=#fff> 달려라 장미의 강민주 扮
탄탄한 연기력과 좋은 비주얼을 가지고 있지만 신의 퀴즈 시리즈를 제외하면 조연급 이상의 비중은 보이지 못하다가, 2018년 사생결단 로맨스에서 처음으로 지상파 미니시리즈에서 서브 주연급 배역을 맡았으나 큰 성과는 보지 못했다. 이후 신의 퀴즈 시리즈의 작가인 박재범 작가가 집필한 열혈사제에도 출연했지만 초반부 이후 비중이 줄어 들면서 별다른 활약을 보이지 못했다.
김수철 감독이 이끄는 여학생들의 팀이 전국대회 우승을 한 놀라운 기적을 쓴 영화 슈팅걸스가 계속 미뤄지고 미뤄지다가 2020년 드디어 개봉하였으며, 여기서 윤주희는 주인공 김수철 감독의 조력자이자, 여학생들의 담임선생님인 은주 역할을 맡았다. 어쨌든 윤주희가 출연한 이 슈팅걸스는 마치 전작 만큼망해버리고 말았다. 여담이지만 이 영화로 윤주희는 축구를 접했다고 하며 FC 인테르나치오날레 밀라노를 응원하기 시작했다고 한다.[5]
<rowcolor=#fff> 펜트하우스에서의 고상아 扮
윤주희 본인 커리어 최전성기의 서막 SBS 월화 드라마 작품인 펜트하우스에 캐스팅되었다는 소식이 전해졌으며 리턴에서 같이 호흡을 맞춘 봉태규와 부부사이로 호흡을 맞출 예정이다. 캐스팅 뉴스 공교롭게도 봉태규와 윤주희는 리턴에서는 불륜 사이였는데 여기선 부부로 출연한다. 그뿐만 아니라 리턴과 매우 캐스팅이 겹치는데, 뿐만 아니라 본인의 시어머니 역 배우인 서혜린도 리턴의 등장인물 중 하나의 배역을 맡았다.그렇게 드라마가 공개되었는데 처음에는 데뷔 이후 첫 숏컷이라[6] 많은 사람들이 몰라봤으나 본인의 연기력으로 엄청난 호평을 받았다. 그 뿐만 아니라 펜트하우스에 등장하는 수많은 기 빨리는 인물들 사이에서 이규진 역의 봉태규, 강마리 역의 신은경과 함께 개그 씬을 담당하는지라 이쪽을 더 좋아하는 이들도 많다. 일단 펜트하우스 시즌 1은 엄청난 성공을 거두었다.
펜트하우스 시즌 1에 이어서 시즌 2도 큰 성공을 거두며 본인의 존재감을 대중들에게 확실하게 알렸으며, 이후 강호동의 밥심에도 아들 역의 이태빈 그리고 김로사, 김동규와 함께 출연했다. 윤주희는 여기서 극 중 역할로 인한 오해를 털어놓는다. 그녀는 아나운서 출신인 고상아 역할에 맞추기 위해 처음으로 도전한 숏컷 스타일링이 너무 잘 어울렸던 나머지 실제 아나운서 출신으로 오해를 많이 받기도 한다는 것 등등을 말하였다. 또 이날 윤주희는 큰 화제가 됐던 극 중 똥물[7] 장면에 대해 똥물에 빠지는 촬영이 좋았다고 밝혀 모두를 의아하게 만든다. 그 이유는 당시 극심한 추위 속에 촬영을 하게 됐는데 주동민 PD가 배우들을 배려해 주변 목욕탕에서 온수를 끌어와서 이 장면을 만든 것이었기 때문이다. 이에 강호동은 서로 아끼는 마음이 그대로 드러난다고 말하였다. 또한 이후 신은경의 영상편지에 눈물을 흘리기도 했다.펜트하우스 종영 이후에는 해치치 않아에 출연하여 엄기준, 봉태규, 윤종훈 등등과 함께 호흡을 맞추었다. 그리고 이후 합류한 김현수와 유진 등등과도 잘 어울리는 모습을 보였고 본인의 힘자랑을 했다.
이후 별 소식이 없다가 2021년 말에 열린 2021 SBS 연기대상 우수 연기상 여자 부문에 후보로 선정되었으나 수상에 실패하면서 데뷔 이후 상과의 지독한 악연에 시달렸다. 특히 더한 것은 헤라팰리스에 거주하는 부모 역을 맡은 배우들 중 유일하게 수상에 실패하였다는 점이다.
드라마 진짜가 나타났다!에서 염수정 역으로 2년만의 작품 복귀를 알렸다. 전작에서 본인이 맡은 캐릭터와 비슷하게 코믹한 요소, 그리고 처음에는 주인공을 괴롭히다가 주인공의 사정을 듣고는 갱생하여 주인공들의 조력자가 되며 마지막에는 해피엔딩을 맞이하는 캐릭터인 염수정을 맡았다.
[1] 원래 꿈은 승무원이다.[2] 그녀의 학교 실습실에 촬영팀이 찾아와 2명을 보조출연 할 사람을 찾는다고 했으며, 그녀를 보자마자 캐스팅 디렉터가 현장에서 바로 캐스팅 제안을 했다고 한다.[3] 배우 연습생 윤주희 씨에 관한 취재를 했던 씨네21의 당시 기사.기사[4] 영화를 보면 윤주희의 연기력에 의문을 표하는 시선들이 많은 것을 알 수 있다.[5] 윤주희는 이미 2014년 브라질 월드컵을 앞두고 신의 퀴즈 출연진들과 함께 국가대표팀을 응원 한 적이 있으나 문제는 결과가 워낙 참담했다는 것이다...[6] 당장 드라마 대본리딩때만 해도 숏컷이 아니었다.[7] 시즌 1[8] 대충 빨간 마스크가 아이를 잡아먹기 위해(?) 쫒아왔다가 마스크를 벗고 먹으려는데 아이가 전혀 무서워하지 않고 마스크를 쓰고 혼내면서 얘기하고 그냥 떠난다(...), 이걸 그저 쓸쓸하게 지켜보며 끝낸다.뭐지?
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